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成都達碩實驗動物有限公司
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犬的使用管理
發(fā)布時間：
2022-12-10 11:36
來源：
《實驗動物管理與使用指南》
一、犬的獲取
1.來源
實驗用犬應購自有犬類實驗動物生產(chǎn)許可證的單位。
2.運輸與接收
(1)實驗動物的運輸應遵循國家有關(guān)活體動物運輸?shù)南嚓P(guān)規(guī)定，國際運輸應遵循國際航空運輸聯(lián)合會(IATA)的有關(guān)規(guī)定。
(2)采用專用航空運輸籠，運輸籠具需經(jīng)消毒、滅菌后方可回收使用，雌雄分裝。
(3)長途采用航空、短途采用專用汽車運輸。
(4)運輸過程中，禁止與有毒有害物品和其他動物混運。
(5)在途時間在12h內(nèi)的，可以不飼喂飼料和飲水，在途時間為12～24h的，只需要提供飲水；在途時間超過24h的，應提供飼喂飼料和飲水。
(6)運輸懷孕犬，應遵循國內(nèi)、國外有關(guān)法律法規(guī)且有專人負責制定整個運輸計劃。
(7)發(fā)運方應盡快將飛機航班號、到港時間等相關(guān)信息及時通知接收方，接收方接收后應盡快運送到最終目的地。
(8)動物到達后檢查運輸籠有無破損，并取出隨附的檔案資料。
(9)檢查犬只編號是否清晰、有無外傷。
(10)對照該犬只檔案檢查精神狀態(tài)、皮毛、眼、口腔、耳、四肢、肛門、外生殖器、糞便等有無異常。
3.隔離檢疫
參照本章第二節(jié)引種管理的有關(guān)內(nèi)容。
二、基本操作技術(shù)
(一)抓取與保定
1.Beagle犬及經(jīng)訓練犬只的抓取與保定
(1)抓取犬只時必須戴手套，穿長袖工作服；動作盡量輕柔，禁止突發(fā)動作。
(2)以正常步速進入飼養(yǎng)室，以友善的目光觀察犬只1～2s，用一只手跟犬打招呼問好，跟犬建立初步信任，打開門后用手輕拍犬臉側(cè)部或撫摸其頭加深犬只對人的信任后，一手迅速抓住犬兩前肢上臂部，一手撫摸犬后頸部，然后一手用力將犬往上提，另一手托住腹部將犬只抱至運輸車或保定架。
(3)將犬抱到保定架后，停留1～2s，將后肢放入定位孔，由助手撫摸犬后背部幫助保定，然后兩手將犬兩前肢分別放入定位孔，撫摸犬后頸部，使犬只安定。
(4)對工作人員信任度不夠或興奮性高的犬只，可以采取抓取兩前肢和后頸部皮膚的辦法，防止犬嘴部靠近保定前肢的手造成誤傷。
(5)禁止以抓揪犬后頸部或后軀部皮膚、提尾巴、抓耳朵的方式抓??；禁止單手抓提犬只。
2.其他犬只的抓取與保定
1)鐵制犬鉗法
雙手持鉗，小心靠近，迅速用長柄捕犬夾夾住頸部，將犬按倒在地，由助手用紗布綁帶將嘴綁好并在犬耳后打結(jié)或給犬帶上金屬網(wǎng)口罩，將四肢固定。
2)皮制項圈法
皮制項圈的大小為項圈與犬頸部的空隙可插入4指。將鏈繩與項圈連接，另外一端拴在籠門上；拉動犬只時，一邊與犬交流一邊輕拉鏈繩拉出室內(nèi)。需要時可用紗布綁帶將嘴綁好或帶上金屬網(wǎng)口罩。
3)不銹鋼籠保定法
保定籠的一邊可移動。慢慢移動擠壓裝置，將犬壓縮至不能轉(zhuǎn)身。如要移出籠外，肌內(nèi)注射鹽酸氯胺酮5～15mg/kg體重麻醉。需要時可用紗布綁帶將嘴綁好或帶上金屬網(wǎng)口罩。
(二)供試品給予方法
1.經(jīng)口途徑
1)徒手給藥法
經(jīng)口腔的供試品應制成小丸狀，一人抓住犬只前肢往上提，后肢著地，另一人戴手套，一手拿供試品，一手捏住上頜盡量使其張開1：3，將供試品送至舌根部，合上嘴輕拍頸部使其吞咽。
2)強飼法
保定狀態(tài)下，由一人將犬嘴張開，另一人左手用壓舌板壓住犬舌，右手用藥匙把供試品送至舌根部，取出壓舌板，喂少量飲水，合上嘴、抬其頭使其下咽。
3)混合飼料給藥法
把供試品與粉末狀飼料充分混合做成顆粒狀，讓犬自由采食給藥。
4)灌胃法
將犬仰臥固定或站立固定，將擴口器(木質(zhì)，長10～15cm，直徑1～3cm，中間開1個直徑5～10mm的小孔)置于上下門3齒后，用綁帶將嘴扎住并在耳后打結(jié)，用12"橡膠灌胃管經(jīng)擴口器上的小孔緩慢插入，沿咽喉后壁進入食道，插入約20cm，可達胃內(nèi)，將胃管另一端插入水中，如不出氣泡，表示確已進入胃，而沒誤入氣管內(nèi)，即可灌入。
2.注射途徑
1)皮下注射
器械和試劑：6號針頭，5～10ml注射器，75％酒精棉球。
注射部位：頸背部或大腿外側(cè)。
方法：用酒精棉球消毒注射部位，左手拇指和食指輕輕提起頸背部皮膚，沿縱軸從頭部方向刺入并推進5～10mm，注射完5s后拔出注射針，并用手指輕壓一下注射部位以免藥液漏出。
2)皮內(nèi)注射
器械和試劑：6號針頭，5～10ml注射器，75％酒精棉球。
注射部位：頸背部或大腿外側(cè)。
用酒精棉球消毒注射部位，注射針橫斷面向上，向皮膚平行方向輕輕刺入，回抽無血后推入藥液，注射完后會形成皮丘，為免藥液漏出注射完5s后再拔針。
3)肌內(nèi)注射
器械和試劑：7號針頭，2～5ml注射器，75％酒精棉球。
注射部位：臀部或股部。
方法：剪去注射部位被毛，用酒精棉球消毒注射部位，注射針橫斷面向上，成60°角輕輕刺入肌肉，回抽無血后推入藥液，退針并用干棉球按壓片刻。
4)靜脈注射
器械和試劑：6號針頭，5～15ml注射器，橡皮帶，75％酒精棉球和碘伏。
注射部位：前肢內(nèi)側(cè)皮下靜脈、后肢小隱靜脈或頸靜脈。
在保定狀態(tài)下，剪去注射部位的被毛，用酒精棉球和碘伏消毒，用橡皮帶扎緊(或用手抓緊)靜脈近端，使血管充盈，從靜脈的遠端將注射針頭平行刺入血管，待有回血后松開，緩緩注入藥液或滴注。
5)腹腔注射
器械和試劑：7號針頭，5～20ml注射器，75％酒精棉球。
注射部位：臍后腹白線兩側(cè)。
腹部向上保定，用酒精棉球消毒注射部位，用注射針平行刺入皮下5mm，再把針豎起45°穿過腹肌進入腹腔，回抽沒有扎到臟器后，再慢慢注入藥液。
6)腦內(nèi)給藥
器械和試劑：6號針頭，1ml注射器，彎頭剪，手術(shù)刀，穿顱鋼針，75％酒精棉球和碘伏。
注射部位：兩耳連線與兩眼連線的中間。
方法：動物麻醉后，剪去注射部位的被毛，用酒精棉球和碘伏消毒注射部位，先用手術(shù)刀切開1～2mm的切口，用穿顱鋼針穿透顱骨，再用注射器針頭刺入5mm左右，然后徐徐注入藥物，注射速度一定要慢，避免引起顱內(nèi)壓急驟升高。
7)小延腦髓池注射
器械和試劑：7號針頭，1ml注射器，75％酒精棉球和碘伏。
注射部位：第一頸椎上方凹陷處。
方法：動物麻醉后，仰臥保定，剪去注射部位的被毛，用酒精棉球和碘伏消毒注射部位，讓頭盡量向胸部彎曲，注射者用左手觸摸第一頸椎上方凹陷處，在凹陷處正中線順水平方向刺入小延腦髓池，回抽見到清亮的脊髓液后徐徐注入。
(三)樣品收集
1.血液樣品采集
1)頸靜脈、后肢外側(cè)小隱靜脈和前肢外側(cè)皮下靜脈采血器械和試劑：6號針頭，2～10ml注射器，取血管，彎頭手術(shù)剪，75％酒精棉球和碘伏。
方法：保定犬只，剪去取血部位被毛并消毒，用橡皮帶扎緊(或用手抓緊)靜脈近端，使血管充盈，針頭平行刺入靜脈，回抽見血后松開橡皮帶或手，采血后用干棉球壓針孔片刻。少量血液的采集可穿刺耳靜脈采集。
2)股動脈采血
器械和試劑：6號針頭，2～10ml注射器，取血管，彎頭手術(shù)剪，75％酒精棉球和碘伏。
方法：仰臥保定犬只，伸展后肢，暴露腹股溝三角動脈，剪去取血部位被毛并消毒，抽血者左手探摸腹股溝動脈搏動處，固定血管，右手持注射針刺入血管，回抽見血后采集。
3)心臟采血
器械和試劑：7號針頭，2～10ml注射器，取血管，彎頭手術(shù)剪，75％酒精棉球。
方法：仰臥保定犬只，前肢向背側(cè)方向固定，暴露胸部，剪去左側(cè)第3～5肋間被毛并消毒，抽血者左手探摸心跳最明顯處，右手持注射針刺入心臟，準確刺入即可見血，可抽取大量血液，采血后用干棉球按壓止血。
4)頸靜脈采血
器械和試劑：7號針頭，2～10ml注射器，取血管，彎頭手術(shù)剪，75％酒精棉球。
方法：側(cè)臥保定犬只，剪去采血部位被毛并消毒，拉直頸部并使頭盡量后仰，抽血者左手拇指壓住頸靜脈，針頭沿血管平行方向向心臟端刺入血管采集，采血后用干棉球按壓止血。
2.尿液樣品采集
1)壓迫膀胱法
新生犬和雌犬可通過輕拍和輕壓腹部膀胱的方法采集。
2)插管法
用大小、長度合適的導尿管，外壁涂抹潤滑油，將導尿管從尿道向膀胱慢慢插入，尿液自然流出或用注射器吸出。
3)代謝籠法
使用犬代謝籠或在飼養(yǎng)籠下放置尿液收集器采集，應避免飼料及飲水等落入收集器。
3.糞便樣品采集
(1)由代謝籠或在飼養(yǎng)籠下采集。
(2)保定狀態(tài)下，用消毒棉簽插入肛門2～5cm采集。
4.精液采集
1)人工采集
選擇成年公犬，由一人保定，另一人退開包皮后，用大拇指和食指輕輕刺激陰莖根
部直到射精。
2)電刺激法
麻醉公犬，站立或臥式保定，剪去包皮周圍被毛，用生理鹽水沖洗后再用無菌干棉球擦干，將電極棒插入直腸并靠近輸精管壺腹部的底壁，選擇頻率，開通電源，由低到高調(diào)節(jié)電壓直至陰莖勃起射精。
(四)麻醉與鎮(zhèn)痛
1.全身麻醉
1)吸入麻醉
應用麻醉呼吸機，常用鹽酸氯胺酮或戊巴比妥鈉做誘導麻醉，以吸入麻醉劑維持麻醉。吸入麻醉劑多應用異氟烷或異氟醚。吸入麻醉的特點是能夠保持呼吸道通暢，便于清除呼吸道內(nèi)分泌物，能夠給氧吸入和輔助呼吸，麻醉過程具有可逆，無蓄積，在機體內(nèi)代謝率低，代謝產(chǎn)物無毒，安全性大，麻醉平穩(wěn)，蘇醒快的特點。缺點是麻醉用設(shè)備、藥品較貴。
2)腹腔和靜脈注射麻醉
腹腔和靜脈注射麻醉劑量見表15-1。
2.局部麻醉
參見大鼠的有關(guān)內(nèi)容(第十一章)執(zhí)行。
3.鎮(zhèn)痛
(1)輕度鎮(zhèn)痛可用卡洛芬、酮洛芬、美沙酮、二氧羥嗎啡酮等，可緩解犬手術(shù)后的痛苦，口服和注射均可應用。
(2)中重度鎮(zhèn)痛可口服萘普生片、口服或注射酮咯酸、口服或注射美沙酮、口服可待因或雙氫可待因。
(五)安死術(shù)
1.急性失血法
保定犬只，在犬耳靜脈或前肢隱靜脈注射3％戊巴比妥鈉或5％苯巴比妥鈉溶液麻醉后，將犬固定在手術(shù)臺或手推車上，仰臥保定，固定四肢和口腔，切開皮膚，分離并結(jié)扎頸動脈，用血管夾向近心端擠壓頸動脈內(nèi)儲血后夾住，切開無血端動脈，向近心端插入放血管扎緊，松開血管夾放血，直至無血液流出為止。
2.過量麻醉法
保定犬只，按90～100mg/kg體重快速靜脈注射戊巴比妥鈉，先停止呼吸再停止心跳死亡。也可以靜脈注射其他麻醉藥，一般以麻醉劑量的20～30倍應用。
使用,注射,棉球,保定,部位,麻醉,酒精,針頭,血管,注射器
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